成果名称：

梅毒螺旋体黏附素在一期梅毒兔模型中黏附作用的初步研究

登记日期：

2021-09-01

完成单位：

南方医科大学皮肤病医院

完成人员：

柯吴坚,张君,黄涛,刘雅慧,张晓辉,吕萍

研究起止日期：

2017-07-01至2019-06-30

主要应用行业：

卫生和社会工作

社会经济目标：

卫生事业发展

评价单位：

广东省卫生和健康委员会

评价日期：

2019-10-10

成果简介：

① 课题来源与背景：课题来源：广东省卫生和计划生育委员会。研究背景：梅毒是由梅毒螺旋体 (Tp)感染所致的一种性传播疾病。Tp的先天传播是发展中国家导致胎儿和围产儿死亡的首要因素。Tp感染引起的早期黏膜损害（硬下疳）为HIV提供进入人体门户，使感染和传播HIV的危险性增加。虽然应用青霉素治疗梅毒便宜有效、避孕套可明显减少梅毒传播、梅毒的血液学诊断技术成熟，但最新流行病学数据显示全球仍约1800万人感染Tp。我国CDC数据显示2015年全国梅毒发病数位居各项传染病第三位，而我省作为梅毒高发区，2015年新增梅毒数5万余例，排名全国第一。因此，有效防控Tp感染迫在眉睫。 ② 研究目的与意义：黏附介导的微生物定植在病原菌感染的起始阶段发挥重要作用，特别是能黏附到宿主多个组织器官、导致全身性播散、引起梅毒的梅毒螺旋体（Tp）感染。但Tp黏附素作为已知能黏附到宿主细胞外基质的Tp外膜蛋白，其确切黏附宿主的作用机制目前仍不清楚。通过对Tp黏附素的研究，将有助于我们加深对梅毒是如何建立感染、侵入宿主各器官组织以及从感染入口区播散到全身等机制的理解。同时，我们的研究将有助于寻找到合适的疫苗靶位从而对抗梅毒的传播。 ③ 主要论点与论据：1）完成分离培养出广东地区首例梅毒螺旋体临床株（GD1）；2）证实GD1与美国Nichols标准株nsSNPs差异；3）完成兔睾丸Tp的连续传代培养并建立一期梅毒硬下疳模型；4）完成黏附素质粒标准品的构建及荧光定量PCR检测兔模型中皮损黏附素转录水平；5）构建含不同TP0136同型异构体的重组质粒，转染Hela细胞获得含荧光信号蛋白；6）优化双抗原夹心法建立的LISA技术，检测不同病期梅毒患者治疗前后血清TP0136抗体。 ④ 创见与创新：黏附介导的微生物定植在病原菌感染的起始阶段发挥重要作用，因此如果能在感染早期通过阻断Tp黏附到宿主成分从而避免梅毒传播成为近年研究热点。但是Tp黏附素作为已知能黏附到宿主细胞外基质的Tp蛋白，其确切黏附宿主作用机制目前仍不清楚。本项目通过建立一期梅毒兔模型，从宿主水平研究目前已知的四种Tp黏附素（TP0136、TP0155、TP0483和TP0751）的转录和蛋白表达水平，同时探讨Tp早期感染过程中诱导宿主产生的四种抗黏附素抗体的免疫反应情况，为进一步阐明Tp黏附宿主作用机制奠定基础。 ⑤ 社会经济效益，存在的问题：1）以第一作者身份发表论著或综述7篇：其中3篇中文论著（2篇发表在中华系列杂志）和4篇综述；2）以并列第一或并列通讯发表SCI论著2篇：其中1篇SCI论著已接收待发表；3）以项目负责人身份成功申请到2018年广东省卫生和计划生育委员会面上项目1项、2017年南方医科大学皮肤病医院基础研究苗圃项目1项；4）申请发明专利1项。 ⑥ 历年获奖情况：无 ⑦ 成果简介要向社会公开，请不要填写商业秘密内容：一期梅毒硬下疳兔模型皮损和血液中四种Tp黏附素（TP0136、TP0155、TP0483和TP0751）转录水平和蛋白水平持续升高，与管家基因和蛋白比较有显著差异，从基因水平和蛋白水平回答Tp黏附素在早期感染中的意义。Tp感染过程中诱导宿主产生的四种抗黏附素抗体水平高表达，从宿主免疫水平回答Tp黏附素在早期感染中的意义。通过对Tp黏附素的研究，将有助于我们加深对梅毒是如何建立感染、侵入宿主各器官组织以及从感染入口区播散到全身等机制的理解。同时，我们的研究将有助于寻找到合适的疫苗靶位从而对抗梅毒的传播。